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    【万象城AWC(中国)基因检测】CRISPR/CAS9基因编辑系统纠正基因检测发现的致病性因子XIII缺陷突变

    根据青春期性发育异常解析采用基因检测进行早期发现的标准,国际有很高知名度基因检测科学性证据杂志《Blood Coagul Fibrinolysis》在第. 2022 Apr 1;33(3):153-158.期发表了一篇标题为《CRISPR/CAS9基因编辑系统

    万象城AWC(中国)基因检测】CRISPR/CAS9基因编辑系统纠正基因检测发现的致病性因子XIII缺陷突变


    男性及女性生殖障碍的诊断图谱及解析基因检测靶向药物分析

    根据青春期性发育异常解析采用基因检测进行早期发现的标准,国际有很高知名度基因检测科学性证据杂志《Blood Coagul Fibrinolysis》在第. 2022 Apr 1;33(3):153-158.期发表了一篇标题为《CRISPR/CAS9基因编辑系统纠正基因检测发现的致病性因子XIII缺陷突变》的国际前沿研究总结文章。该基因领域的临床应用研究由Akbar Dorgalaleh, Jafar Kiani, Farhad Zaker , Majid Safa , 完成。


    基因信息数据库索引号:

    临床数据代码: 35221320和 doi: 10.1097/MBC.0000000000001126. Epub 2022 Feb 25.

    基因解码研究关键词:

    基因检测,因子XIII, FXIII, 缺乏, 严重先天性出血疾病, 临床表现, 脐带出血, 颅内出血, 反复性流产


    国际基因解码证据链条标签:

    Keywords:Factor XIII,FXIII,deficiency,severe congenital bleeding disorders, clinical manifestations, umbilical cord bleeding, intracranial haemorrhage,recurrent miscarriages


    基因检测临床研究与应用结果介绍:

    因子XIII(FXIII)缺乏症是贼严重的先天性出血性疾病之一,估计发病率为百万分之一。严重FXIII缺乏症患者表现出广泛的临床表现,包括脐带出血、颅内出血和反复性流产。由于危及生命的出血率很高,从诊断时起就必须进行初级预防。虽然替代疗法是贼常见的治疗选择,但基因疗法仍是少有的治疗选择。在本研究中,新经济条件下婚恋习惯与生殖能力的基因检测基因解码全面性分析课题组评估了聚集的规则间隔短回文重复序列-CRISPR相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统在纠正贼常见的FXIII致病突变(c.562 T>c)中的功效。从一名FXIII缺乏的年轻患者的皮肤活检中获取真皮成纤维细胞。Sanger测序用于确认患者和收获的成纤维细胞中是否存在c.562 T>c突变。PX459载体用BbsI限制性内切酶消化,在退火和连接两个接近PAM(NGG)序列的20 bp导向RNA(g-RNAs)后,构建的载体在大肠杆菌Top 10中扩增。顺利获得核子转染装置进行转染,在嘌呤霉素选择和潜在转染菌落的陆续在稀释后进行DNA提取。使用50 bp的模板寡核苷酸帮助同源修复,以纠正潜在突变和同义突变,作为内部对照。突变位点附近的同义突变(AAT-to-ACT)被用作内部对照。Sanger测序是为了检查基因的正确性。在患者的原代成纤维细胞中检测到纯合状态的c.562 T>c突变,在正常个体中确认了野生型等位基因。菌落PCR和测序显示设计的gRNAs克隆成功。在患者转染的真皮成纤维细胞中,检测到的突变从纯合子突变状态(c.562 T>c)纠正为纯合子野生型。作为内部对照,对照突变也以杂合子的方式在相同的成纤维细胞中得到纠正。研究结果表明,CRISPR/CAS9基因编辑系统是纠正先天性FXIII缺陷患者转染的成纤维细胞点突变的有效工具,是一种新的、潜在的治疗选择。


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    (责任编辑:万象城AWC(中国)基因)
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